Selenium supplementation prevents DNA damage in ram spermatozoa / Suplementação com selênio previne danos ao DNA espermático de ovinos

ABSTRACT: In the present study, we aimed to evaluate the effects of different concentrations of selenium (Se) ovine nutritional supplementation on spermatozoa DNA integrity. Thirty male ovines (age: 10 months) were used. They were fed with hay and ram food in an intensive system, which was divided into stalls (5 m long and 3 m wide) with feeding troughs, and had ad libitum access to food and water. Ovines in group 1 (G1, the negative control) received mineral salt supplementation without Se; ovines in G2 received the same mineral salt mixed with 5 mg Se (as sodium selenite)/kg mineral supplement;ovines in G3 received 10 mg Se/kg mineral supplement; ovines in G4 received 15 mg Se/kg mineral supplement; and ovines in G5 received 20 mg Se/kg mineral supplement. Ovines in all groups remained untreated for 14 days, followed by a treatment period of 56 days. Semen samples were obtained by electroejaculation. The DNA damage in semen samples was evaluated using the comet assay. The experimental design was implemented using a 5 × 5 Latin Square, i.e., five treatments and five experimental periods. The mean differences were compared using Tukey's test at a significance level of 5%. The control group (G1) showed a high percentage of DNA damage compared to the Se-treated groups (G2-G5). Therefore, Se supplementation could decrease the basal level of DNA damage in sperm cells, suggesting that Se might exert protective effects on sperm DNA.

RESUMO: O presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da suplementação mineral com diferentes concentrações de selênio (Se) sobre a integridade de DNA espermático de ovinos. Utilizaram-se 30 machos, com 10 meses de idade. Eles foram mantidos em sistema intensivo, sendo alimentados com feno e ração própria para ovinos, divididos em baias (5 m x 3 m), com cochos e água ad libitum. Os ovinos do grupo 1 (G1=controle negativo) receberam suplementação de sal mineral sem a adição de Se, os animais do G2 receberam a mesma mistura mineral, porém com 5 mg de Se (selenito de sódio)/kg mistura mineral, os ovinos do G3 receberam 10 mg Se/kg mistura, os animais do G4 receberam 15 mg Se/kg mistura, os do G5 receberam 20 mg Se/kg mistura. Os ovinos de todos os grupos passaram por um período de adaptação de 14 dias, seguido por um período de tratamento de 56 dias. O sêmen foi colhido por meio de eletroejaculação. A integridade do DNA espermático foi avaliada por meio do teste de cometa. O modelo experimental utilizado foi Quadrado Latino 5 x 5, com cinco grupos e cinco períodos experimentais. A diferença entre as médias foi analisada pelo teste de Tukey, com 5% de nível de significância. O grupo controle (G1) apresentou elevada porcentagem de danos quando comparada aos demais grupos de tratamentos (G2 a G5). Portanto, a suplementação de Se diminui o nível de danos ao DNA espermáticos, sugerindo que o Se pode exercer efeitos protetores sobre o DNA dos espermatozoides de ovinos.

Paracoccidioidomycosis: no genetic damage in human peripheral blood cells of patients assessed by single-cell gel (comet) assay

Paracoccidioidomycosis is a systemic fungal infection caused by Paracoccidioides brasiliensis. As infectious diseases can cause DNA damage, the authors aimed at analyzing DNA breakage in peripheral blood cells of patients with paracoccidioidomycosis by using the comet assay. The results suggested that paracoccidioidomycosis does not cause genotoxicity.

Paracoccidioidomicose é micose sistêmica causada pelo Paracoccidioides brasiliensis. Considerando que doenças infecciosas são capazes de induzir danos genéticos, o objetivou-se analisar quebras no DNA em células de sangue periférico de pacientes com paracoccidioidomicose utilizando o teste do cometa. Os resultados sugeriram que essa enfermidade não exerce genotoxicidade.

Ausência de efeito genotóxico induzido por esteróides anabolizantes em indivíduos fisiculturistas / Lack of genotoxicity induced by steroids anabolic in bodybuilding practicers

Os esteróides anabolizantes vêm sendo utilizados indiscriminadamente com a finalidade de aumentar amassa muscular e melhorar o desempenho em competições esportivas. No entanto, os efeitos dessesesteróides sobre a saúde humana foram pouco avaliados. O presente estudo propôs verificar o potencialgenotóxico de esteróides anabolizantes em indivíduos fisiculturistas utilizando o teste do cometa, capazde detectar lesões primárias no DNA. Para isso, foram coletadas amostras de sangue periférico de 63voluntários, sendo 23 praticantes do fisiculturismo não competitivo e usuários de esteróidesanabolizantes; 20 fisiculturistas não usuários dos esteróides e 20 indivíduos sedentários, que nãopraticavam exercício físico rotineiro (grupo controle). Nos protocolos de tratamento utilizados pelosusuários de esteróides estavam inclusos: o stanozolol, o decanoato de nandrolona, o cipionato detestosterona e a oximetolona. Os resultados mostraram que não houve diferença estatisticamentesignificante (P > 0,05) nos níveis de danos no DNA (“tail moment”) entre os grupos avaliados. Destaforma, conclui-se que o treinamento físico de força muscular, bem como o uso de esteróides anabolizantesdurante o treinamento.

Anabolic steroids have been used in order to increase muscular mass and to improve the performance insporting competitions. The aim of the present study was to evaluate the genotoxic effect of anabolicsteroids in bodybuilders, using the comet assay that is able to detect primary DNA damage. Peripheralblood samples were collected from 63 volunteers: 23 bodybuilders and anabolic steroids-users; 20 bodybuilders-non-steroids users; and 20 sedentary individuals, who did not practice any physical exercise(control group). The used anabolic steroids included: stanozolol, nandrolone decanoate, testosteronecypionate, oxymetholone and a combination of testosterone decanoate, testosterone phenylpropianate,testosterone isocaproate and testosterone propianate. The results showed no statistically significantdifference (P > 0.05) in the level of DNA damage (tail moment) among the groups. In conclusion, theseresults suggest that the anabolic steroids, as well as resistance training (bodybuilding) did not induceincrease of DNA damage in peripheral blood leukocytes.

Study of DNA damage induced by dental bleaching agents in vitro

Clareamento dental é um procedimento simples e conservador para restaurar esteticamente a cor de dentes vitais e não-vitais. Entretanto, alguns estudos têm demonstrado o risco de dano tecidual a partir do contato desses agentes com a mucosa bucal. Neste presente estudo, o potencial genotóxico associado à exposição aos agentes clareadores dentais foi avaliado pelo teste de células individualizadas em gel (teste do cometa) in vitro. Células de ovário de hamster chinês (CHO) in vitro foram expostas a seis agentes clareadores dentais comercialmente disponíveis (Clarigel Gold – Dentsply; Whitespeed – Discus Dental; Nite White – Discus Dental; Magic Bleaching – Vigodent; Whiteness HP – FGM e Lase Peroxide – DMC). Os resultados mostraram que todos os agentes clareadores testados contribuíram para os danos no DNA, como demonstrado pela média do momento da cauda, sendo o efeito mais forte observado na mais alta dose de peróxido de hidrogênio (Whiteness HP e Lase Peroxide, na concentração de 35%). Por outro lado, Magic Bleaching (Vigodent) induziu o menor nível de quebras no DNA. Os controles negativo e positivo apresentaram ausência e presença de danos no DNA, respectivamente. Em suma, esses resultados sugerem que os agentes clareadores dentais podem ser um fator que aumenta o nível de danos no DNA. Uma concentração de peróxido de hidrogênio mais elevada produziu atividades nocivas mais severas no genoma como detectado pelo teste do cometa.

Lack of DNA damage induced by fluoride on mouse lymphoma and human fibroblast cells by single cell gel (comet) assay

O flúor tem sido amplamente usado na Odontologia, pois é um agente profilático efetivo e específico contra a cárie dentária. Entretanto, o flúor em excesso pode representar perigos à saúde humana, especialmente por causar agressão ao material genético. Testes de genotoxicidade constituem uma parte importante da pesquisa do câncer para a avaliação de risco de possíveis carcinógenos. Neste estudo, danos ao DNA associados à exposição ao flúor foram avaliados pelo teste de células individualizadas em gel de agarose (teste do cometa) in vitro. Células de linfoma murino e fibroblastos humanos foram expostas ao fluoreto de sódio (NaF) nas concentrações finais de 7 a 100 µg/mL durante 3 h a 37ºC. Os resultados mostraram que o NaF não contribuiu para os danos ao DNA em ambos os tipos celulares estudados e em todas as concentrações testadas, conforme demonstrado pelas médias do momento da cauda e intensidade da cauda dos cometas. Estes achados são clinicamente importantes, uma vez que representam uma importante contribuição para a avaliação do risco potencial à saúde associada à exposição a agentes geralmente empregados na prática odontológica.

In vitro biocompatibility tests of two commercial types of mineral trioxide aggregate / Testes de biocompatibilidade in vitro de duas formas comerciais do agregado de trióxido mineral

Recentemente, o agregado de trióxido mineral (MTA) regular e branco estão sendo utilizados na Odontologia como materiais para obturação retrógrada de canais radiculares. Testes de genotoxicidade e citotoxicidade formam uma importante parte da pesquisa do câncer e da avaliação de risco de carcinógenos potenciais. Assim, o objetivo deste estudo foi examinar a genotoxicidade e citotoxicidade do MTA branco e regular in vitro pelo teste do cometa e teste de exclusão pelo azul de tripan, respectivamente. Células do linfoma murino foram expostas às duas formas de apresentação do MTA nas concentrações finais de 1 a 1.000 µg/mL por 3 horas a 37ºC. Os resultados mostraram que ambos os compostos testados não produziram efeito genotóxico em todas as concentrações testadas. Da mesma forma, nenhuma diferença estatisticamente significativa (p > 0,05) foi observada na citotoxicidade. Em suma, nossos resultados sugerem que o MTA regular e branco não são genotoxinas e não são capazes de interferir na viabilidade celular conforme avaliado pelo teste do cometa e ensaio do azul de tripan, respectivamente.

Fluoride does not induce DNA breakage in Chinese hamster ovary cells in vitro

O flúor tem sido amplamente usado na Odontologia, pois é um agente profilático efetivo e específico contra a cárie dentária. Entretanto, o flúor em excesso pode representar perigos à saúde humana, especialmente por causar agressão ao material genético. Testes de genotoxicidade representam uma importante parte da pesquisa do câncer para a avaliação de risco de possíveis carcinógenos. Neste presente estudo, danos ao DNA associados à exposição ao flúor foram avaliados pelo teste de células individualizadas em gel de agarose (teste do cometa) in vitro. Células de ovário de hamster chinês foram expostas ao fluoreto de sódio (NaF) nas concentrações finais de 7 a 100 µg/ml, durante 3 h, a 37ºC. Os resultados mostraram que o NaF não contribuiu para os danos no DNA em todas as concentrações testadas, conforme demonstrado pelas médias do momento da cauda e da intensidade da cauda dos cometas. Esses achados são clinicamente importantes, uma vez que representam uma importante contribuição para a correta avaliação do potencial risco à saúde associada à exposição aos agentes odontológicos.

Biopatologia do Helicobacter pylori / Biopathology of Helicobacter pylori

A infecção pelo Helicobacter pylori (H.pylori) induz inflamação persistente na mucosa gástrica com diferentes lesões orgânicas em humanos, tais como gastrite crônica, úlcera péptica e câncer gástrico. Os fatores determinantes desses diferentes resultados incluem a intensidade e a distribuição da inflamação induzida pelo H. pylori na mucosa gástrica. Evidências recentes demonstram que cepas do H.pylori apresentam diversidade genotípica, cujos produtos acionam o processo inflamatório por meio de mediadores e citocinas, que podem levar a diferentes graus de resposta inflamatória do hospedeiro, resultando em diferentes destinos patológicos. Cepas H. pylori com a ilha de patogenicidade cag induzem resposta inflamatória mais grave, através da ativação da transcrição de genes, aumentando o risco para desenvolvimento de úlcera péptica e câncer gástrico. O estresse oxidativo e nitrosativo induzido pela inflamação desempenha importante papel na carcinogênese gástrica como mediador da formação ou ativação de cancerígenos, danos no DNA, bem como de alterações da prolifereção celular e da apoptose.

No mutations found in exons of TP53, H-RAS and K-RAS genes in liver of male Wistar rats submitted to a medium-term chemical carcinogenesis assay

The standart protocol to evaluate the carcionogenic potencial of chemicals is the long-term bioassay in rodents, not performed in developing countries due to its high cost and complex operational procedures. Our laboratory has established an alternative an alternative medium-term bioassay in Wistar rats, also DMBDD assay, based on the paradigm iniation/promotion of chemical carcinogenesis. This method was accepted by the Brazilian Environment Agency (IBAMA) as an official source of evidence of carcinogenity. The aim of this study was to evaluate alterations in exons 5 to 8 of the tumor suppressor gene TP53 and exons 1 and 2 of oncogenes K-RAS and H-RAS in preneoplastic hepatic lesions observed in DMBDD assay. The characterization of these alterations may contribute to the recognition of patterns of damage in critical genes, as well as to suggest mechanisms of action of the compounds tested in the protocol. Sixty male wistar rats were separeted into3 groups? the first was treated with no chemicals; the second received five initiaing agents and the third received initiation followed by phenobarbital. Liver DNA samples (obtained from formalin-fixed and parafin-fixed and paraffin-embedded tissues after histological analysis) were evaluated by the non-isotopic PCR-SSCP technique. No changes in any analyzed exons were detected by the PCR-SSCP banding pattern in all experimental groups. This suggests that liver in exons 5 to 8 of TP53 and exons 1 and 2 of H-RAS are not among the early molecular alterations occuring in the hepatic carcinogenesis process by the DMBDD protocol in male Wistar rats

O risco genético das terapias do câncer / The genetic risk of cancer therapy

O presente artigo descreve as conseqüências de algumas terapias utilizadas para o câncer sobre o material genético de pacientes com neoplasias. O objetivo é ressaltar a importância da avaliação da relação risco/benefício dos diferentes tratamentos utilizados para o câncer, e da continuidade de pesquisas para o desenvolvimento de novas formas de terapia e de novas drogas antineoplásicas. Faremos breve exposição sobre o processo de carcinogênese de múltiplas etapas, destacando o conceito geral de que o câncer é uma doença genética. São apresentados os efeitos mutagênicos das radiações ionizantes e de algumas classes de quimioterápicos sobre o material genético. Além dos efeitos deletérios desses agentes para o paciente, são também relatados efeitos nocivos para os indivíduos que manipulam ou que são responsáveis pela condução dos tratamentos. Abordaremos de modo geral, os danos genéticos induzidos por agentes antineoplásicos mutagênicos tanto para o paciente como para os indivíduos que os manipulam, predispondo-os ao desenvolvimento de um segundo tumor ou de um tumor primário, respectivamente.

An indirect evaluation of liquid inseticide concentrations in atmospheres for mutagenicity experiments

A method for the generation of a dichlorvos atmosphere to be used in mutagenicity experiments is proposed, based on a simple device which allows indirect estimation of insecticide concentration. The system can also be applied to other kinds of liquid insecticides, since it is simply based on the weight losses of the flask during vaporization